过氧化氢酶在生命科学、医疗、环境保护和食品工业应用广泛。那么，如何测定过氧化氢酶的活性呢？一种应用最为广泛的方法是显色法。
首先，测定过氧化氢酶活性所需的试剂有：避光瓶、3%的过氧化氢、10%缓冲液、铁离子、联苯胺（或其他氨基酚类化合物）。
具体操作流程如下：
1. 预处理：将5ml无菌去离子水、100μl 10%缓冲液和50μl 测试样品混合，放置5min。
2. 加试剂：在试剂空白组和测试样品中分别加入：50μl的铁离子（1mg/ml）和50μl的联苯胺（0.5mg/ml）。
3. 加过氧化氢：添加50μl的3%过氧化氢，迅速混匀后，记录吸光值。
其中，显色反应的原理是过氧化氢和联苯胺在存在铁离子的条件下，产生马氏反应，物质O2·-与Fe3 配成Fe4 ，随即联苯胺被氧化产生绿色产物。
未经处理和无过氧化氢的样品是阴性对照，可以检验其他因素对结果的影响。
测定结果为吸光度值，过氧化氢酶活性的计算公式为：过氧化氢酶活性=△A254/（0.036×Vtest×T）U/mg蛋白。